EzRed? 核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料,可替代剧毒的溴化乙锭 (EB),EzRed? 核酸染料是一种的油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。不易挥发升华,人体不会吸入。艾姆斯氏测试结果表明EzRed? 核酸染料在凝胶染色浓度下无诱变性,是一种安全无毒的核酸染料。EzRed? 核酸染料与EB具有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置(普通紫外凝胶透射仪),在300 nm处紫外光激发检测即可,但是EzRed? 核酸染料不能被488nm氩离子激光器或者类似波长的可见光激发,通常不推荐用该类激发装置的仪器成像。EzRed? 核酸染料适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA, ssDNA以及RNA染色,可以选择胶染法或泡染法进行染色,使用非常方便、灵活。本产品以溶解在水溶液中的形式存在。溶解在水中的 EzRed? 核酸染料是更安全的配方,强烈推荐使用水溶液的EzRed? 核酸染料。
EzRed? 核酸染料有如下特点:
1.比EB更安全:无致突变性和处置无害
2.比EB和SYBR? Safe 灵敏得多
3.在室温下稳定,可微波加热
4.简单的预制或电泳后凝胶染色,无需脱色
5.在不改变设备或光学设置的情况下替换EB
6.兼容下游凝胶纯化、限制性消化、测序和克隆
运输与保存
常温运输;避光室温保存,有效期5年。
使用方法
由于核酸结合染料会影响 DNA 迁移,强烈建议行电泳,凝胶后染色。使用EzRed? 进行后染色具有出色的灵敏度,并消除了染料干扰 DNA 迁移的可能性!!!
一、胶染法(同EB,电泳前染色)
1. 配制合适浓度的琼脂糖凝胶,微波炉加热至熔化。
2. 加入EzRed? 核酸染料,使用终浓度为1×(即每50 mL 琼脂糖溶液中加入5 μL EzRed? 10,000×水溶液)。
3. 将含有EzRed?核酸染料的琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子,室温下凝固约30-60 min。
4. 按照常规方法上样并电泳。
5. 紫外拍照观察。
【注】:EzRed?具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,也可以将EzRed?储液加到含有琼脂糖粉末的电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。EzRed?兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 配制合适浓度的琼脂糖凝胶,微波炉加热至熔化。
2. 将琼脂糖溶液倒入制胶器并插好梳子,室温下凝固约30-60 min。
3. 按照常规方法上样并电泳。
4. 用0.1 M NaCl溶液稀释EzRed? 10,000×水溶液至3× 染色液(即将15 μL EzRed? 10,000×水溶液加入到50 mL 0.1 M NaCl溶液中,该染液可重复使用3次左右,室温避光保存)。
5. 将凝胶放入合适的容器中,加入3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右。染色时间与凝胶厚度及浓度有关。对于含3.5~10%聚丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随聚丙烯酰胺含量增加而延长。
6. 紫外拍照观察。
注意事项
EzRed? 核酸染料(10,000×水溶液)
1. 若大分子条带拖尾且分离不理想,建议减少DNA marker或核酸样本的上样量。
2. 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅作科研用途!
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